在巴黎举办的2022年国际性乙肝病原体（HBV）自然科学全会上，自然科学研究相关人员如是说了生物医药子公司（Replicor）研制的一类多肽树脂（NAP）REP2139韦谢列，即辨识抗病原体多肽树脂REP 2139中 Hsp40 异性DNAJB12的促进作用监督机制，并确认其在乙肝母细胞核（HBsAg）排泄中非常重要。
自然科学研究相关人员如是说，乙肝病原体的亚病原体微粒（SVP）在构筑循环式中的 HBsAg > 99.99。SVP的型态出现/排泄的大分子监督机制尚不确切。NAPs，它能在不负面影响乙肝e抗体（HBeAg）或 Dane 微粒释放出来的情况下阻碍 SVP 的装配/排泄，并与生长因子和 TDF 联手采用时，能同时实现 HBsAg 高坏账率和机能性治好。
图1，DNAJB12的减缓或其对HBsAg排泄的负面影响
(A) DNAJB12的Western-blot。在第6天测量HepG2.2.15细胞核、shRNA阳性靶向(mock)或卢瓦龙县DNAJB12靶向(KD DNAJB12)中DNAJB12水准。(B)HIAADNAJB12 shRNA慢病原体后6天对HBsAg排泄减缓的负面影响。
REP 2139的共免疫沉淀/下拉试验：自然科学研究相关人员进行了 MS/MS 分析数据，发现 DNAJB12 是 REP 2139 的潜在性机理。为了验证这种相互促进作用，对生物素化的REP 2139 (REP 2139- b)进行了共免疫沉淀和下拉试验。用 NP40 裂解液裂解HepG2.2.15细胞核，并用50 nM的REP 2139或REP 2139- b孵育过夜。
采用 NAP 生物素化的 REP 2139进行下拉试验，然后用质谱法鉴定出Hsp40异性蛋白DNAJB12，它是一类参与 SVP 型态出现的新蛋白。DNAJB12位于内质网膜，在那里它决定了新生跨膜蛋白的命运，并导致错误折叠蛋白的降解。DNAJB14是 Hsp40 家族成员，结构与 DNAJB12 相似，可能与 DNAJB12 形成异二聚体。
图2
将REP 2139与DNAJB12 (A) HepG2.2.15细胞核相互促进作用，用蛋白G珠与抗生物素抗体和REP 2139 +/-生物素偶联培养。(B) HepG2.2.15细胞核经M-270链霉亲和素珠和REP 2139 +/-生物素裂解培养。在这两个实验中，DNAJB12都在洗脱液(IP)和剩余的上清液(S)中被检测到。
图4，DNAJB12/B14敲低对HBsAg排泄的负面影响
(A) DNAJB12和DNAJB14 shRNA慢病原体的卢瓦龙县剂量-反应效应。我们还证实，由于DNAJB14与DNAJB12高度相似，这两个shRNA之间没有交叉效应。
结果表明，REP2139 靶向 DNAJB12，并阻止 Hsc70/Hsp70的招募，以适当折叠HBsAg，导致其蛋白酶体的降解。这些结果与在体外存在 REP2139 时细胞核内 HBsAg 无积累和 HBsAg 从肝脏清除一致。
DNAJB12是 Hsp40 的异性，对乙肝母细胞核的排泄非常重要，并被REP2139靶向。DNAJB12 与 Hsp70 和 HBsAg 共定位与其在 HBsAg 折叠中的异性功能一致。DNAJB14，可被 REP 2139 沉淀，但在 HBsAg 的排泄中不起主要促进作用。
假设 REP 2139 通过j结构域与 DNAJB12 相互促进作用，基于j结构域中暴露的α-螺旋的存在和REP 2139的双亲和性。需要做进一步实验以证实这种相互促进作用。在 REP 2139 存在或不存在情况下，Hsc70/Hsp70 与 DNAJB12 的相互促进作用将通过 PLA 和拉下试验（pull-down）进行评估。
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